پرایمرها در PCR
PCR نیازمند سنتز یک سری توالیهای الیگونوکلئوتیدی است که در سنتز DNA جدید به صورت انتخابی، به عنوان پرایمر عمل میکنند. پرایمرها اختصاصی دو توالی بلافاصله مجاور رشته هدف بوده و طولی در حدود ۱۸ تا ۲۵ نوکلئوتید دارند. سنتز…
زهره محمدی
جهش مقاومت به ویروس HIV
ویروس HIV از مهلکترین تهدیدهای سلامت انسان در جهان مدرن است. از نخستین مورد گزارششده ابتلا به ایدز در سال ۱۹۸۱ تا کنون، ۲۵ میلیون نفر در اثر این ویروس جان خود را از دست دادهاند. از بین میلیونها نفری…
گیرندههای شبه تول: سنسورهای تشخیص عفونت
انواع فراوانی از میکروبها از جمله ویروسها، باکتریها، قارچها و تک یاختهها آماده حمله به بدن انسان و استفاده از محیط سرشار از مواد غذایی هستند که فراهم میکند. خوشبختانه پاسخ ایمنی به عنوان یک سیستم دفاعی عمل و با…
تکنیک FISH
تکنیکهایی که پیشتر به آنها پرداختیم، وابسته به هیبریداسیون مولکولهای DNA و یا RNA خالصشدهای هستند که در ژل آگارز قرار دارند. در تکینک FISH (Fluorescent in situ hybridization)، مولکولهای پروب مستقیما با مولکولهای DNA و RNA داخل سلولی هیبرید…
تکنیک DNA microarray
DNA microarry ها، تکنیکهایی بر پایه هیبریداسیون هستند، اما در مقیاسی مینیاتوری اجرا میشوند. در نتیجه این کار میتوان به طور همزمان میلیونها مولکول هدف را آنالیز نمود. تکنولوژیهای هیبریداسیون microarray در اوایل دهه ۱۹۹۰ توسعه یافتند و امکان انجام…
تکنیک Northern Blotting
تکنیکهای Northern blotting نیز مانند Southern blotting بر پایه هیبریداسیون اسیدهای نوکلئیک هستند و تفاوتشان در آن است که مولکولهای هدف، RNA های هضمنشده (معمولا mRNAها) میباشند. این تکنیکها به منظور سنجش اندازه رونوشتها و نیز دستیابی به الگوی بیان…
تکنیک Southern blotting
این تکنیک ژنتیک مولکولی، برای نخستین بار در سال ۱۹۷۵ و توسط Edwin Southern معرفی شد و هدف از انجام آن، تشخیص واریانتهای ژنتیکی بود. کاربرد مهم هیبریداسیون Southern blotting در تعیین توالیهای هدفی است که مشابه ژن مورد استفاده…
پروب های نوکلئیک اسیدی
با افزایش روزافزون توالیهای نوکلئیکاسید شناخته شده و نیز وجود روشهایی برای سنتز الیگونوکلئوتیدهای دلخواه، امروزه میتوان قطعات DNA تکرشتهای کوتاهی را برای انجام هیبریداسیون DNA طراحی کرد. این قطعات پروب DNA نامیده میشوند. پروبها، مولکولهای DNA ای هستند که…
الکتروفورز DNA
تکنیک الکتروفورز در ژل به منظور جداسازی قطعات DNA بر اساس اندازه به کار میرود و به این منظور از تفاوتهای بار الکتریکی مولکولهای موجود در مخلوط استفاده مینماید. مولکولهای DNA دارای بار منفی هستند؛ در نتیجه با قرار گرفتن…
تکنیک توالی یابی Illumina
اساس تکنیک توالی یابی Illumina تکنیک دی دئوکسی است، اما از نوآوریهای فراوان دیگری نیز بهره برده است. در این تکنیک علیرغم پایین بودن تعداد توالیهای خوانده شده، محصولات بیشتری نسبت به تکنیک توالی یابی ۴۵۴ تولید میشود. طی این…