تشخیص وجود مقادیر اندک جهشها در جستوجوی بیوماکرها و هدف های درمانی ضروری است؛ اما چالش اصلی، کشف تکنیکهایی است که بتوانند این تشخیص را به صورت قابل اتکایی انجام دهند. تکنیک COLD-PCR یا co-amplification at lower denaturation temperature-PCR نوعی از PCR…
آنالیز SSCP) Single-strand conformation polymorphism analysis) آنالیز پلیمورفیسم کانفورماسیون تکرشتهای (Single-stranded conformation polymorphism) یا SSCP، که به صورت PCR-SSCP نیز انجام میگیرد، متد غربالگری پرکاربردی است که امکان شناسایی واریانتهای ژنومی مختلف را در تعداد فراوانی از نمونهها و انواع زیادی…
تکنیک PCR اختصاصی متیلاسیون (Methylation specific PCR= MSP)، متدی ساده، سریع و مقرون به صرفه به منظور آنالیز وضعیت متیلاسیون DNA است که تقریبا میتواند روی هر گروه از CpGهای داخل یک جزیره CpG که در پروموتر ژنها واقع است،…
PCR چیست؟ PCR یا واکنش زنجیره ای پلیمراز (Polymerase Chain Reaction) در زیستشناسی مولکولی بهمنظور ساخت میلیونها کپی از قطعه DNA موردنظر، بهکارمیرود. به عبارت دیگر، PCR مانند یک دستگاه فتوکپی که میتواند از یک برگ کاغذ، نسخههای فراوانی تهیه کند،…
تکنیک PCR-VNTR به معنای PCR تکرارهای پشت سر هم با تعداد متغیر (Variable Number Tandem Repeats) به منظور آنالیز آنها است و مارکرهای بسیار مهمی را به منظور تشخیص هویت و نقشهبرداری ژنومی فراهم میکند. آنالیز و مقایسه طول این…
آنالیز PCR-RFLP که CAPS نیز نامیده میشود (Cleaved Amplified Polymorphic Sequence)، تکنیکی پرکاربرد در آنالیزهای ژنتیکی است. PCR-RFLP ترکیب دو تکنیک میباشد: PCR، تکنیکی است که امکان تکثیر ناحیه خاصی از DNA را که توسط دو پرایمر تعیین میشود، فراهم…
PCR نیازمند سنتز یک سری توالیهای الیگونوکلئوتیدی است که در سنتز DNA جدید به صورت انتخابی، به عنوان پرایمر عمل میکنند. پرایمرها اختصاصی دو توالی بلافاصله مجاور رشته هدف بوده و طولی در حدود ۱۸ تا ۲۵ نوکلئوتید دارند. سنتز…
تکنیکهایی که پیشتر به آنها پرداختیم، وابسته به هیبریداسیون مولکولهای DNA و یا RNA خالصشدهای هستند که در ژل آگارز قرار دارند. در تکینک FISH (Fluorescent in situ hybridization)، مولکولهای پروب مستقیما با مولکولهای DNA و RNA داخل سلولی هیبرید…
DNA microarry ها، تکنیکهایی بر پایه هیبریداسیون هستند، اما در مقیاسی مینیاتوری اجرا میشوند. در نتیجه این کار میتوان به طور همزمان میلیونها مولکول هدف را آنالیز نمود. تکنولوژیهای هیبریداسیون microarray در اوایل دهه ۱۹۹۰ توسعه یافتند و امکان انجام…
تکنیکهای Northern blotting نیز مانند Southern blotting بر پایه هیبریداسیون اسیدهای نوکلئیک هستند و تفاوتشان در آن است که مولکولهای هدف، RNA های هضمنشده (معمولا mRNAها) میباشند. این تکنیکها به منظور سنجش اندازه رونوشتها و نیز دستیابی به الگوی بیان…