الکتروفورز DNA
تکنیک الکتروفورز در ژل به منظور جداسازی قطعات DNA بر اساس اندازه به کار میرود و به این منظور از تفاوتهای بار الکتریکی مولکولهای موجود در مخلوط استفاده مینماید. مولکولهای DNA دارای بار منفی هستند؛ در نتیجه با قرار گرفتن…
تکنیک الکتروفورز در ژل به منظور جداسازی قطعات DNA بر اساس اندازه به کار میرود و به این منظور از تفاوتهای بار الکتریکی مولکولهای موجود در مخلوط استفاده مینماید. مولکولهای DNA دارای بار منفی هستند؛ در نتیجه با قرار گرفتن…
اساس تکنیک توالی یابی Illumina تکنیک دی دئوکسی است، اما از نوآوریهای فراوان دیگری نیز بهره برده است. در این تکنیک علیرغم پایین بودن تعداد توالیهای خوانده شده، محصولات بیشتری نسبت به تکنیک توالی یابی ۴۵۴ تولید میشود. طی این…
Massively parallel pyrosequencing در سال ۲۰۰۵ توسط شرکت ۴۵۴ Life Sciences توسعه یافت و توسط Roche تجاریسازی شد. این تکنیک، توالی یابی ۴۵۴ نام دارد و نخستین تکنیک از توالی یابیهای نسل جدید است. توالی یابی ۴۵۴ میتواند بیش از…
معرفی توالی یابی نسل جدید (Next Generation Sequencing= NGS) در سال ۲۰۰۷ تحولی در دنیای ژنومیکس پدید آورد، روشی کاملا جدید برای تعیین توالی DNA معرفی نمود و هزینه و زمان موردنیاز برای توالی یابی ژنوم را به شدت کاهش داد.…
در سال ۱۹۷۴ Fredrick Sanger تکنیکی را به منظور تعیین توالی ژنها در محیط in vitro ابداع کرد. او به توالی آمینواسیدی انسولین علاقهمند بود و تصمیم گرفت که با استفاده از توالی نوکلئوتیدی آن به توالی آمینواسیدیاش برسد. متدی…
بسیاری از متدهای امروزی دستکاری DNA، RNA و پروتئینها، وابسته به وجود دانش قبلی راجع به توالی نوکلئوتیدی ژنوم موردنظر هستند. اما خود این توالیها برای نخستین بار چگونه شناخته شدهاند؟ و امروزه توالی مولکولهای DNA و RNA چگونه تعیین…
استخراج RNA باکیفیت غالبا مهمترین مرحله در بسیاری از تکنیکهای مولکولی مانند RT-qPCR، آنالیز ترانسکریپتومیکس با استفاده از توالییابی Next generation، digital PCR، تولید کتابخانه cDNA و … است. از آن جایی که RNA از لحاظ ساختاری بسیار با DNA…
تعیین دقیق مقادیر اندک نوکلئیکاسید موجود در نمونههای بیولوژیکی، یکی از نیازمندیهای آزمایشگاههای تحقیقاتی و تشخیصی است. Competitive PCR یکی از تکنیکهایی است که میتواند این کار را انجام دهد و عبارت است از تکثیر همزمان DNA هدف با مقادیر…
colony PCR یا whole cell PCR تکنیکی است که به منظور بررسی وجود تغییر ژنتیکی دلخواه در پلاسمیدهای وارد شده به باکتریها و مخمرها در اثر ترانسفورماسیون، مورد استفاده قرار میگیرد. این فرایند مستقیما روی کلونیهای باکتریایی انجام میشود و…
Touchdown PCR به منظور افزایش اختصاصیت PCR به کار میرود. از جمله راههای رسیدن به این هدف، تغییر دادن پارامترهای مربوط به هر چرخه است. در Touchdown PCR، این تغییر در مرحله اتصال چرخه ایجاد میشود. به این نحو که…